Genetic Variation of the Equine Serum Protease Inhibitor System Pi (Pr) Characterized By an Enzyme Binding Staining Technique After Starch Gel Electrophoresis

Abstract

A modification of Uriel & Berges (1968) staining technique has been developed for starch gels. This method, which makes use of the Pi proteins ability to bind trypsin and chymotrypsin, allows for the recognition of the Pi zones which migrate into slower positions than originally described by Braend (1970). The Pi zones appear as white bands against a lilac background. Serum samples from 18 sire families selected according to the Pi type of the sires have been studied. Ten families were Norwegian Trotter, 8 were Warm-blood Trotter (Standardbred). In each family 12 dam-offspring pairs were examined. In trypsin-treated gels the white zones usually correspond to those previously recognized by protein-staining. In addition, the products of the Pi^G, Pi¹, Pi^L and Pi^W alleles each had 1 distinct slow band, but in different positions. The products of the Pi^N and Pi_U alleles lacked slow zones. The Pi^s and Pi^T alleles differed with respect to the positions of their slow bands. A new allele Pi^T1 was identified. This has a slow band in a different position from that of the Pi^L allele. An allele indistinguishable from Pi^Z was recognized in Norwegian Trotter in which also a new alle Je temporarily called Pi^Y could be demonstrated. In chymotrypsin-treated gels the zone patterns of some of the allele products differed from those seen after trypsin-treatment.

Sammendrag

En modifikasjon aν Uriel & Berges’ (1968) fargemetode er blitt utviklet til brak for stivelsesgel. Denne metode beror på at Pi pro-teinene binder trypsin og chymotrypsin. Den muliggjør bestemmelse av Pi soner som vandrer saktere enn de som opprinnelig ble besternt av Brænd (1970). Pi sonene viser seg som hvite bånd mot en lilla bakgrunn. Serumprøver utvalgt etter fedrenes Pi typer er blitt under-søkt for ialt 18 familier, 10 aν norsk traver, 8 av varmblod traver. Ηver familie bestod av 12 mor-avkom par. I geler som er behandlet med trypsin vil de hvite soner vanligvis tilsvare dem som sees etter proteinfarging. I tillegg viste produktene av Pi^G, Pi^I, Pi^L og Pi^W allelene et saktere, tydelig band hver, men i forskjellige posisjoner.

Slike sakte bånd manglet hos produktene til Pi^N og Pi^U allelene. Allelene Pi^S og Pi^T var forskj ellige med hensyn til sakte bånd. En ny allel Pi^L1 er blitt pävist. Denne har et sakte band i en annen posisjon enn Pi^L allelen. En allel som synes å tilsvare Pi^Z ble funnet hos norsk traver, hvor også en ny allel, forel0pig kalt Pi^Y er blitt påvist. I geler behandlet med chymotrypsin viste sonemønstrene seg for noen av allelproduktene å være forskj ellige fra dem som sees etter trypsin-behandling.